ICU病房消毒隔离制度室温宜保持在20℃～22℃为宜，湿度应保持在50%～60%为好，要有监测温湿度的装置。ICU房间应定期消毒处理，室内空气培养要求细菌总数在200个每立方米（200个/m3）以下。控制出入人员的数量，减少其流通量。
开门窗换气，一般每日2～3次，每次20～30min。
紫外线照射、84消毒液，可配成1:500的溶液进行喷雾。
严格洗手制度任何正常人皮肤上都有细菌存在，其中有少数致病菌，如金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌等，在正常人皮肤上不致引起感染，若一旦转移到人体易感部位，如伤口、肺部或泌尿生殖器等部位，尤其是在重症患者极易引起感染。为减少人与人之间的传播，防止交叉感染的发生在接触两个患者和两邻床之间，为病人作查体前，各种技术操作及无菌操作前，处理尿壶、便盆后，进入或离开ICU时，均应认真进行手的清洗，必须要在清洗后用75%的酒精溶液进行擦拭消毒。
ICU内墙壁、天花板，应保持无尘和清洗，每日应清洁处理，可用含氯消毒液500mg/L彻底擦洗一次。门窗、床柜、病床及各种装备仪器表面每日需用500mg/L84消毒液擦拭。各种各式的抹布分开使用，分类放置，每人每桌一块，定期消毒。地面可用500mg/L的84消毒液清洁处理，每日应不少于4次。
严格隔离制度转送进入ICU与进手术室一样，应当使用清洁车或活动床。严格掌握患者进入ICU的分房标准，为了预防交叉感染和防止其散布，进入ICU的患者一定要分房治疗，如患者本人无感染但需要肾透析者，宜住单房间。有潜在感染病例如气管切开、进行机械通气治疗的患者须住单房间。有传染病患者、器官移植后免疫力低下的患者以及有明显感染者如开放性化脓或引流的脓胸病人等均需住隔离房间。隔离房间应在位于通气道的末端或ICU之外。
ICU内的机械通气应定时按说明更换通气机的细菌滤过器，以及每24h换一次通气的管道和连接器，为预防院内感染的主要措施。雾化吸入器在使用前后应适当消毒处理。ICU内使用雾化吸入器管道一般都是用1000mg/L的84消毒液浸泡消毒或清洗后熏蒸消毒。ICU内使用的外科器械必须彻底灭菌。
进入ICU要求更换衣鞋，戴帽子和口罩，外出时必须加隔离衣，更换外出鞋。所用衣、帽、口罩应每天换洗，以保持清洁。
